Is daar ander metodes om PCR-produkte te suiwer?
Is daar ander metodes om PCR-produkte te suiwer?

Video: Is daar ander metodes om PCR-produkte te suiwer?

Video: Is daar ander metodes om PCR-produkte te suiwer?
Video: Solving The Voynich Manuscript With Ai | Greg Kondrak 2024, November
Anonim

Vir die toepassings wat vereis PCR skoonmaak of validering van PCR resultate, daar is twee metodes algemeen gevolg: PCR produk isolasie met behulp van 'n kolom, en gel suiwering van 'n agarosegel.

Watter tipe chromatografie word hierin gebruik om PCR-produkte te suiwer?

Om die PCR-produkte te suiwer, word grootte-uitsluitingschromatografie gebruik. Dit vang klein molekules soos proteïen, primers , en nukleotiede terwyl groot molekules soos PCR-produkte te groot is om die krale binne te gaan en deur die kolom in die versamelbuise te gaan.

Ook, hoe suiwer jy DNA? Basies, jy kan suiwer jou DNA monsters deur jou sel- en/of weefselmonsters te lyseer deur gebruik te maak van die mees geskikte prosedure (meganiese ontwrigting, chemiese behandeling of ensiematiese vertering), die nukleïensure van die kontaminante te isoleer en dit in 'n geskikte bufferoplossing te presipiteer.

Verder, hoekom suiwer ons PCR-produk?

Suiwering van DNA van a PCR reaksie is tipies nodig vir stroomaf gebruik, en fasiliteer die verwydering van ensieme, nukleotiede, primers en bufferkomponente. Algemeen gebruikte metodes gebruik spinkolomme wat 'n silikamatriks bevat waaraan DNA selektief gebind kan word in die teenwoordigheid van chaotropiese soute.

Hoekom moet die DNA skoongemaak word?

Ons skoon op DNA uit waterige oplossings om buffersoute, ensieme of ander stowwe wat stroomaftoediening kan beïnvloed, te verwyder. Voorbeelde sluit in PCR-reaksie skoon op, skoon op na beperking verteer en skoon op van genomiese of plasmied DNA besmet is met sellulêre proteïene/rommel.

Aanbeveel: