Waarom moet die spektrofotometer op 'n spesifieke golflengte gestel word?
Waarom moet die spektrofotometer op 'n spesifieke golflengte gestel word?

Video: Waarom moet die spektrofotometer op 'n spesifieke golflengte gestel word?

Video: Waarom moet die spektrofotometer op 'n spesifieke golflengte gestel word?
Video: Master Quantum Physics FAST: Crash Course in Theoretical Physics! 2024, November
Anonim

Wanneer jy die golflengte op 'n spektrofotometer , jy is verander die posisie van die prisma of diffraksierooster sodat anders golflengtes van lig is op die spleet gerig. Hoe kleiner die spleetwydte, hoe beter is die vermoë van die instrument om verskeie verbindings op te los.

Daarvan, op watter golflengte sal die spektrofotometer gestel word?

Afhangende van die reeks golflengte van die ligbron, kan dit in twee verskillende tipes geklassifiseer word: UV-sigbare spektrofotometer: gebruik lig oor die ultravioletreeks (185 - 400 nm) en sigbare reeks (400 - 700 nm ) van elektromagnetiese stralingspektrum.

Net so, hoekom moet jy die spektrometer kalibreer elke keer as jy die golflengte verander? Spektrofotometer moet wees gekalibreer teen 'n leë oplossing so daardie metings daarna kan die blanko-oplossing se absorpsie as 'n nulverwysing gebruik. 'n Maatstaf van die kapasiteit van 'n stof om lig van 'n gespesifiseerde te absorbeer golflengte.

op watter golflengte moet die lesings geneem word?

Neem lesings met 5 nm-intervalle 'n bietjie voor en daarna golflengte . Byvoorbeeld, as die maksimum absorpsie gevind is by 450 nm, dan om 'n meer akkurate te kry lees van λmax, neem absorpsie lesings by 440, 445, 455 en 460 nm.

Hoekom meet jy die absorpsie van die oplossing by 550 nm?

Proteïene reageer met koperione in alkalies oplossing om 'n violetkleurige kompleks te vorm wat lig absorbeer by 550 nm . Daarom, deur meet die konsentrasie van die kompleks, met behulp van A550 ( Absorbansie by 550 nm ), jy is ook meet die konsentrasie van proteïen.

Aanbeveel: