INHOUDSOPGAWE:

Hoe vind jy die konsentrasie van DNA uit absorpsie?
Hoe vind jy die konsentrasie van DNA uit absorpsie?

Video: Hoe vind jy die konsentrasie van DNA uit absorpsie?

Video: Hoe vind jy die konsentrasie van DNA uit absorpsie?
Video: Настоящий конструктор от Дэволт! Ремонт болгарки DeWALT - подробно! 2024, November
Anonim

DNA konsentrasie word beraam deur die meting van die absorpsie by 260nm, verstel die A260 meting vir troebelheid (gemeet deur absorpsie by 320nm), vermenigvuldig met die verdunningsfaktor, en gebruik die verwantskap wat 'n A260 van 1.0 = 50 µg/ml suiwer dsDNA.

Net so, vra mense, hoe vind jy die konsentrasie van DNA?

Om die konsentrasie van DNS in die oorspronklike monster te bepaal, voer die volgende berekening uit:

  1. dsDNA-konsentrasie = 50 μg/mL × OD260 × verdunningsfaktor.
  2. dsDNA-konsentrasie = 50 μg/ml × 0.65 × 50.
  3. dsDNA-konsentrasie = 1.63 mg/ml.

Ook, wat is 'n goeie DNS-konsentrasie? A goed kwaliteit DNA monster moet 'n A hê260/A280 verhouding van 1,7-2,0 en 'n A260/A230 verhouding van groter as 1,5, maar aangesien die sensitiwiteit van verskillende tegnieke vir hierdie kontaminante verskil, moet hierdie waardes slegs geneem word as 'n riglyn vir die suiwerheid van jou monster.

Op hierdie manier, absorbeer DNA by 280 nm?

Die verhouding van absorpsie by 260 nm vs 280 nm is algemeen gebruik word om te assesseer DNA kontaminasie van proteïenoplossings, aangesien proteïene (veral die aromatiese aminosure) absorbeer lig by 280 nm.

Hoe gebruik jy NanoDrop vir DNA-konsentrasie?

Basies die nanodrop gee jou die opsie om te kies DNA , RNA, Proteïene. Jy moet kies DNA , plaas dan 2 ΜL water (mili Q voorkeur) kies "Blank" daarna plaas nog 2 ΜL water om te bevestig dat die maat 0 is. Plaas dan 2 ΜL van jou monster. Jy sal die maat kry.

Aanbeveel: